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070040 大腸埃希氏菌O157:H7生化鑒定盒 12種×10次

英文名稱(chēng):

貨 號(hào) :070040

規(guī) 格 :12種×10次

用途:用于大腸埃希氏菌O157:H7的生化鑒定。

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細(xì)菌新型生化鑒定管使用說(shuō)明  

   ―― 070040 大腸埃希氏菌O157:H7生化鑒定盒(12種×10次)管 

一)大腸埃希氏菌O157:H7生化鑒定盒 整套試劑及用品

鑒定生化反應(yīng)的12種試劑及配套試劑5種(表1)、0.85%無(wú)菌生理鹽水10瓶、0.5 McFarland的濁度管1瓶、一次性吸管10支。 

二)生化管的使用方法

開(kāi)啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無(wú)菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)鋁蓋,撕開(kāi)鋁蓋,打開(kāi)西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。

三)大腸埃希氏菌O157:H7生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法

將疑是大腸埃希氏菌O157:H7的新鮮菌苔置于已配備的無(wú)菌生理鹽水中,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ), 37℃培養(yǎng)18-24h,用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結(jié)果觀察見(jiàn)表1。注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時(shí)間或培養(yǎng)方式,請(qǐng)?jiān)斠?jiàn)每種生化鑒定管附帶的使用說(shuō)明。

西林瓶使用方法

表1
產(chǎn)品名稱(chēng)結(jié)果判定培養(yǎng)時(shí)間(小時(shí))使用說(shuō)明
陽(yáng)性陰性
山梨醇黃色紫色18-24 
纖維二糖
棉子糖
蛋白胨水紅色不變色24培養(yǎng)后加靛基質(zhì)試劑2-3滴,立即觀察結(jié)果。
西蒙氏檸檬酸鹽藍(lán)色不變色24-48西林瓶半加塞(如圖2右兩瓶所示)用接種針挑取新鮮菌苔在斜面上劃“之”字形接種,豎立培育。
鳥(niǎo)、賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)管藍(lán)綠色,對(duì)照管變試驗(yàn)管與對(duì)照管均變黃18-24每株被檢菌應(yīng)同時(shí)接種氨基酸對(duì)照管一支,并加滅菌液體石蠟5-8滴覆蓋培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)18-24小時(shí),未見(jiàn)陽(yáng)性結(jié)果,繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí),再做最終結(jié)果判定。
半固體瓊脂擴(kuò)散生長(zhǎng)無(wú)擴(kuò)散生長(zhǎng)24-48用接種針挑取新鮮菌苔穿刺接種,豎立培育。
三糖鐵瓊脂產(chǎn)氣有氣泡無(wú)氣泡24西林瓶半加塞(如圖2右兩瓶所示)用接種針挑取新鮮菌苔穿刺,穿刺完畢后在斜面上劃“之”字形接種,豎立培育。
分解蔗糖、(或)乳糖斜面和底層變黃色不變色
分解葡萄糖底層變黃,斜面不變色或者紅色加深不變色
產(chǎn)H2S變黑色不變色
葡萄糖磷酸鹽胨水MR紅色不變色24-48培養(yǎng)后加MR試劑2-3滴,立即觀察結(jié)果。
VP紅色不變色48培養(yǎng)后依次加入10滴VP試劑甲液及4滴乙液,混勻,再培養(yǎng)10-20分鐘觀察結(jié)果。
備注:本鑒定盒是按照環(huán)凱產(chǎn)品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。

四)大腸埃希氏菌O157:H7的生化鑒定程序(見(jiàn)下圖)和生化鑒定特征(見(jiàn)表2)

凡符合上述大腸埃希氏菌O157:H7生化反應(yīng)的純菌落,經(jīng)用抗E.coli O157:H7標(biāo)準(zhǔn)血清或EHEC O157:H7乳膠凝集試劑測(cè)試呈陽(yáng)性結(jié)果,即可報(bào)告為該食品試樣中檢出大腸埃希氏菌O157:H7。

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