產(chǎn)品名稱:One-Step RT-PCR Kit
中文名稱:一步法 RT-PCR 試劑盒(一步法逆轉錄-聚合酶鏈反應試劑盒)
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:
編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 產(chǎn)品價格 |
HKE045-01A | One-Step RT-PCR Kit | 200次 | 一步法 RT-PCR 試劑盒 (一步法逆轉錄-聚合酶鏈反應試劑盒 | 英文全稱:One-step reverse transcription-polymerase chain reaction kit) | 1695 |
產(chǎn)品描述:One-Step RT-PCR Kit 一步法 RT-PCR 試劑盒是基于本公司Reverse Transcriptase 反轉錄酶(Cat.No: HKE123)和 HotStart Taq DNA 聚合酶(Cat.No: HKE017),對緩沖液體系進行優(yōu)化使 反轉錄酶和聚合酶同時發(fā)揮最大功效,具有方便、快速、靈敏度高、重 復性好等特點。該試劑盒能以動物、植物和微生物的總 RNA 或 mRNA 為模板,cDNA 合成和 PCR 反應在一個管中進行,反轉錄結束后可直接進行 PCR 循環(huán)而不用增加額外的步驟;同時可對低至 1fg 的總 RNA 進行擴增,有助于大量樣品的處理并減少污染機會。
產(chǎn)品特點:
效率高,可反轉錄 GC 含量 ,二級結構復雜的 RNA 模板。
獨特的緩沖體系使反轉錄酶和聚合酶同時發(fā)揮最大功效。
操作簡單,可最大限度的避免污染。
注意事項:
1)本試劑盒 PCR 擴增延伸時間為 1kb/min,客戶可根據(jù)具體片段長度進行延伸時間的調(diào)整。
2)通常情況,28~30 個循環(huán)可達到最佳擴增,對于低拷貝目的基因的檢測,可將循環(huán)數(shù)增加到 40 個。
3)如果同時操作多個樣品,建議先在冰上先配制預混液,然后再分裝到各個反應管中,加入模板啟動反應。
4)反應出現(xiàn)目標條帶拖帶,系模板濃度過高或特異引物濃度不適等原因所致,可對模板及引物濃度等進行調(diào)整;反應出現(xiàn)雜帶,可對退火溫度進行調(diào)整,或重新設計特異性高的引物。
5)本試劑盒只需使用特異性反轉錄引物,無需使用 Random Primer 和 Oligo dT Primer 等進行反轉錄反應。
6)為了保證反應的正常進行,需使用高質量的 RNA 模板。
保存溫度:-20℃。
產(chǎn)品包裝(A包裝):
操作方法:
1)將 RNA 模板、引物 、 2×One-Step RT-PCRSuperMix,RT Enzyme Mix 和 RNase Free Water 溶解并置于冰上備用。
2) 配制以下反應體系:
3)輕輕混勻后短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底。
4)設置反應程序: