產(chǎn)品名稱：SaCas9 Nuclease
中文名稱：SaCas9 核酸酶
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格：
| 編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 價(jià)格 |
| HKE372 | SaCas9 Nuclease | 50μg/盒 | crispr基因編輯（核酸酶） | 1365 |
產(chǎn)品描述：
CRISPR/Cas9 是細(xì)菌和古細(xì)菌在長期演化過程中形成的一種適應(yīng)性免疫防御系統(tǒng)。CRISPR/Cas9 系統(tǒng)將入侵噬菌體和質(zhì)粒 DNA 的片段整合到 CRISPR 序列中，并利用相應(yīng)的 CRISPR RNAs（crRNAs）來指導(dǎo) Cas9 蛋白對同源序列的降解，從而提高免疫性。人工改造過的 Cas9/sgRNA 系統(tǒng)通過 sgRNA（short guide RNA）引導(dǎo) Cas9 蛋白 識別并剪切帶有 sgRNA 靶點(diǎn)的雙鏈 DNA，可用于基因敲除和精確編輯 DNA 等操作。
SaCas9 Nuclease 識別 5'-NNGRRT-3' PAM 序列，較長的 PAM序列具有更高的特異性。此外，該酶蛋白分子量相對于 SpCas9 較小，在電轉(zhuǎn)時(shí)具有更高的轉(zhuǎn)化效率。本產(chǎn)品提供的 Cas9 核酸內(nèi)切酶通過在蛋白兩端加了核定位信號（NLS），可使蛋白進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行基因組編輯。
產(chǎn)品特點(diǎn)：可顯著降低脫靶效應(yīng)； 純蛋白體系，避免 CRISPR 基因敲除時(shí)引入質(zhì)?；虿《靖蓴_。
產(chǎn)品用途：
1，基于蛋白與 sgRNA 轉(zhuǎn)染的非病毒載體 CRISPR 基因敲除；
2，基于蛋白與 sgRNA 轉(zhuǎn)染的非病毒載體 CRISPR 基因敲入；
3，sgRNA 剪切靶點(diǎn) DNA 效率檢測，降低體內(nèi)篩選成本；
4，體外剪切靶 DNA 的特異位點(diǎn)。
應(yīng)用實(shí)例：圖例）SaCas9 Nuclease 做 DNA 片段切割活性檢測：
帶有靶位點(diǎn)的DNA 片段為 1500bp，酶切后的片段為 1000bp 和 500bp。
保存溫度：-20℃保存，或-80℃長期保存。
SaCas9 Nuclease 產(chǎn)品包裝（A包裝）：
| 產(chǎn)品組成 | 體積 |
| SaCas9 Nuclease(1μg/μl) | 50 μL |
| 10× SaCas9 Reaction Buffer | 500μl |
保存體系：20mM HEPES，500mM KCl，0.1Mm DTT，1%Sucrose，PH7.5，25℃。
質(zhì)量保證：經(jīng)多次柱純化，SDS-PAGE 膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶，純度達(dá) 95%；內(nèi)毒素含量<100EU/mg；qPCR 方法檢測無大腸桿菌基因組殘留；無 RNase、核酸內(nèi)、外切酶污染。
體外切割體系（20μL）：
| dsDNA | 200 ng |
| sgRNA | 200 ng |
| SaCas9 Nuclease | 0.2-1 ug |
| 10× SaCas9 Reaction Buffer | 2 μl |
| RNase Free Water | To 20 μl |
37 ℃保溫 1 h、70℃保溫 10 min
注：在反應(yīng)體系中可添加 RNase Inhibitor 至 1U/μl，防止RNase 污染。
相關(guān)產(chǎn)品：
| HKE365 | Cas9 Nuclease |
| HKE366* | Cas9 D10A Nickase |
| HKE367** | Cas9 H840A Nickase |
| HKE368*** | Cas9(D10A,H840A) Nuclease |
| HKE369 | sgRNA In Vitro one-step Transcription Kit |
| HKE370 | sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit |
* 為 Cas9 D10A Nickase，能在與 sgRNA 靶序列互補(bǔ)的 DNA 鏈上產(chǎn)生切口，從而形成功能性的單鏈斷裂，可以減少意外的脫靶基因修飾。
** 為 Cas9 H840A Nickase，能在與 sgRNA 靶序列非互補(bǔ)的DNA 鏈上產(chǎn)生切口，從而形成功能性的單鏈斷裂，可以減少意外的脫靶基因修飾。
***為 Cas9(D10A,H840A) Nuclease，為 Cas9D10A，H840A 雙突變失活酶，具有靶 DNA 結(jié)合活性，但無切割活性，可用于陰性對照等用途。
