無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基的秘密
發(fā)布時(shí)間：2022-05-10 瀏覽次數(shù)：2114
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生命科學(xué)研究領(lǐng)域是不可或缺的。在科研上，細(xì)胞培養(yǎng)基（medium）一般都會(huì)加入血清（Serum）來(lái)補(bǔ)充蛋白質(zhì)（protein）、生長(zhǎng)因子（growth factor）或其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（nutrients）等，大部分細(xì)胞培養(yǎng)會(huì)選擇使用胎牛血清（fetal bovine serum, FBS）。近年來(lái)也陸續(xù)有多樣的血清種類，例如：人類血小板生長(zhǎng)因子（platelet-rich plasma, PRP）、小牛血清（bovine growth serum, BGS ）等，環(huán)凱集團(tuán)供應(yīng) 的 胎牛血清 (FBS) 可用于敏感細(xì)胞系培養(yǎng)、細(xì)胞學(xué)驗(yàn)證、抗體藥物開(kāi)發(fā)、小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)、雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)、昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)、病毒包裝等，其細(xì)胞增殖檢査克隆率均≥90%。
為什么要發(fā)展無(wú)血清培養(yǎng)基？
顧名思義，無(wú)血清培養(yǎng)基（serum-free medium, SFM）系指不含任何血清成分的合成培養(yǎng)基。近年來(lái)，因?yàn)榧?xì)胞治療（cell therapy）的快速發(fā)展與生物工業(yè)上的制備抗體、病毒抗原或是重組蛋白表達(dá)時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)基中的血清成分復(fù)雜，可能會(huì)影響制程或是增加不穩(wěn)定的因素，因此，無(wú)血清培養(yǎng)基成為其目標(biāo)，現(xiàn)今已有許多成熟的產(chǎn)品可供應(yīng)研究人員做選擇。
血清培養(yǎng)基的缺點(diǎn)
血清是一種成分極為復(fù)雜的混合物，為細(xì)胞培養(yǎng)增添了許多不可控制的變因。含有血清的培養(yǎng)基缺點(diǎn)如下：
(1) 價(jià)格昂貴，血清的費(fèi)用約占細(xì)胞培養(yǎng)費(fèi)用的50-60%。
(2) 血清可能會(huì)帶有污染源，F(xiàn)BS最常見(jiàn)的即為支原體或黑膠蟲(chóng)污染。
(3) 血清中復(fù)雜的成分會(huì)使疫苗、細(xì)胞因子、單克隆抗體等的分離或純化帶來(lái)很大的困擾。
無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)
? 避免血清批次間的差異，提高細(xì)胞培養(yǎng)的可重復(fù)性。
? 避免血清自身的污染源污染。
? 避免血清成分影響研究結(jié)果或是產(chǎn)品制程。
? 提高產(chǎn)品表達(dá)水平并易于純化。
無(wú)血清培養(yǎng)基的秘密
無(wú)血清培養(yǎng)基（SFM）的主要成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加物，每家廠商的無(wú)血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分其實(shí)大同小異，重要的是其中的添加的黏附因子與生長(zhǎng)因子等。其主要成分為下列幾種：
黏附因子：約有80%的細(xì)胞是屬于貼附型生長(zhǎng)。一般的細(xì)胞培養(yǎng)基是利用血清作為其來(lái)源，在無(wú)血清培養(yǎng)基中，細(xì)胞黏附因子就是很重要的物質(zhì)，一般多為細(xì)胞外基質(zhì)（Extracellular Matrix）的組成分，例如：laminin、collagen、fibronectin等，這些成分可以幫助細(xì)胞貼附并維持細(xì)胞生長(zhǎng)型態(tài)。
生長(zhǎng)因子：生長(zhǎng)因子是維持細(xì)胞活性與促進(jìn)細(xì)胞增生、遷移、分化等，不可或缺的要素。
酶抑制劑：貼附型細(xì)胞一般多以胰蛋白酶（trypsin）進(jìn)行繼代。在一般細(xì)胞培養(yǎng)中，F(xiàn)BS就含有抑制trypsin的成分，當(dāng)加入新鮮含有FBS的medium時(shí)便會(huì)終止trypsin的反應(yīng)，所以無(wú)血清培養(yǎng)基必須添加trypsin抑制劑。
