培養(yǎng)基：RPMI-1640和DMEM
發(fā)布時(shí)間：2023-05-15 瀏覽次數(shù)：844
基礎(chǔ)培養(yǎng)基分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基
合成培養(yǎng)基：根據(jù)細(xì)胞生存所需物質(zhì)的種類和數(shù)量，用人工方法模擬合成的，目前有許多種培養(yǎng)基，如RPMI-1640、DMEM；
細(xì)胞完全培養(yǎng)基：90%合成培養(yǎng)基+10%血清+1%的雙抗
RPMI是Roswell Park Memorial Institute的縮寫(xiě)，代指洛斯維·帕克紀(jì)念研究所。RPMI是該研究所研發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號(hào)。
RPMI-1640 培養(yǎng)基最初開(kāi)發(fā)用于人白血病細(xì)胞的懸浮或單層培養(yǎng)，后來(lái)被發(fā)現(xiàn)也適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞，包括 HeLa 、 Jurkat 、 MCF-7 、 PC-12 、 PBMC 、星形膠質(zhì)細(xì)胞和癌細(xì)胞，尤其適用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，是使用最為廣泛的培養(yǎng)基之一。
RPMI-1640培養(yǎng)基含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素、生物素、維生素 B12 、PABA，高濃度的維生素肌醇和膽堿。RPMI-1640 培養(yǎng)基不含蛋白、脂質(zhì)或生長(zhǎng)因子，因此，RPMI-1640 需要補(bǔ)充劑，通常添加 10% 胎牛血清 (FBS)。
DMEM是在最低必需培養(yǎng)基(Eagle"s minimum essential medium MEM）的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的，分高糖型（含葡萄糖4500mg/L）和低糖型(含葡萄糖1000mg/L)兩種.
低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，特別適用于生長(zhǎng)速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。
高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，也適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來(lái)生長(zhǎng)點(diǎn)的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。例如CHO細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)乙肝疫苗、CHO細(xì)胞表達(dá)EPO。
注：
貼壁生長(zhǎng)：必須貼附于支持物表面才能生長(zhǎng)。包括大多數(shù)上皮細(xì)胞，纖維細(xì)胞等
懸浮生長(zhǎng)：不需要貼附于支持物表面，懸浮狀態(tài)下即可生長(zhǎng)。包括淋巴細(xì)胞，腫瘤干細(xì)胞等
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