濾膜過濾法在醫(yī)療中測定菌落總數(shù)的應(yīng)用！
發(fā)布時(shí)間：2023-06-13 瀏覽次數(shù)：1510
文章轉(zhuǎn)載于“金壇第一人民醫(yī)院公眾服務(wù)號(hào)”，作者：感染管理科
原標(biāo)題：【檢測升級(jí)】濾膜過濾法—菌落檢測大升級(jí)
2021年6月，我院感染管理科正式采用濾膜過濾法進(jìn)行內(nèi)鏡洗脫液、透析用水、透析液、口腔用水的細(xì)菌檢測，實(shí)現(xiàn)了菌落檢測方法的升級(jí)。
01 為什么要使用濾膜過濾法？
GB15982-2012《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》內(nèi)鏡的檢查方法中關(guān)于內(nèi)鏡清洗消毒后的檢查方法明確要求使用“濾膜法過濾”。
而我院一直使用的是傳統(tǒng)的涂布法，涂布法采集的液體樣本量較少，接種于培養(yǎng)皿中的樣本量少，導(dǎo)致細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果代表性不高。因此我院按照國標(biāo)要求，使用濾膜過濾法進(jìn)行菌落檢測，以提高細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的代表性。
02 什么是濾膜過濾法？
是使用真空泵負(fù)壓抽濾，在濾杯內(nèi)的滅菌微孔濾膜上下面產(chǎn)生壓差，使濾杯內(nèi)的洗脫液由于壓差作用通過滅菌微孔濾膜，使得微生物被攔截在滅菌微孔濾膜上。
規(guī)范中要求使用孔徑0.45μm的濾膜，可攔截直徑0.45μm以上的微生物（絕大多數(shù)細(xì)菌的直徑大小在0.5μm ~5μm之間），從而高效地?cái)r截微生物，更準(zhǔn)確地檢測樣本中的菌落數(shù)。
03 濾膜過濾法的操作流程
以內(nèi)鏡洗脫液為例
1. 用物準(zhǔn)備
清洗消毒后胃鏡、50ml洗脫液、一次性注射器（50ml、2.5ml）、微生物檢測儀、濾膜、濾杯、無菌手套、速干手消毒劑、無菌鑷子、培養(yǎng)皿等。
2. 儀器組裝
先后用75%酒精及滅菌水清洗消毒微生物檢測儀，然后關(guān)閉通氣閥門，組裝濾杯及濾膜。
3. 采樣樣本接種
將收集的50ml洗脫液，其中2ml洗脫液分別接種2個(gè)營養(yǎng)瓊脂平板，剩余的48ml洗脫液倒入濾杯中，打開通氣閥門，等洗脫液被抽干后關(guān)閉通氣閥門。卸下濾杯后，用無菌鑷子取出濾膜，將濾膜接種在凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上（注意不要產(chǎn)生氣泡）。
4. 培養(yǎng)條件
置于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。
采用濾膜法檢測的樣本合格率可能遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)采樣法，但又能較為客觀地反映內(nèi)鏡的清洗消毒質(zhì)量。
其原因包括50mL洗脫液能夠比10mL洗脫液更充分地接觸到消毒內(nèi)鏡的內(nèi)表面，濾膜過濾時(shí)能夠?qū)⑾疵撘褐械奈⑸锔咝r截且對(duì)微生物的損傷較小，利于微生物的培養(yǎng)，得到更準(zhǔn)確的菌落計(jì)數(shù)結(jié)果。
因此，濾膜法能夠更加靈敏、可靠地評(píng)價(jià)內(nèi)鏡的清洗消毒工作，更進(jìn)一步保護(hù)內(nèi)鏡檢查患者的安全，提高醫(yī)療質(zhì)量。
濾膜過濾法不僅可以用于內(nèi)鏡洗脫液的細(xì)菌量檢測，也可用于透析用水、透析液、純化水等的檢測，我院感染管理科會(huì)致力于按照國家規(guī)范，利用先進(jìn)儀器提高細(xì)菌檢測質(zhì)量，發(fā)現(xiàn)醫(yī)院重點(diǎn)部門隱藏的問題，保證患者醫(yī)療安全。
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