培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)方式及類型
發(fā)布時(shí)間:2023-12-14 瀏覽次數(shù):1314
體外培養(yǎng)的細(xì)胞,按其生長(zhǎng)方式可分為貼附型和懸浮型兩大類。
1.1 貼附生長(zhǎng)型細(xì)胞
為附著于底物(支持物)表面生長(zhǎng)的細(xì)胞,本書主要討論本型細(xì)胞的培養(yǎng)。活體體內(nèi)的細(xì)胞除血細(xì)胞外,當(dāng)離體培養(yǎng)時(shí)大多數(shù)以貼附型方式生長(zhǎng)。必須貼附于底物才能生長(zhǎng)的細(xì)胞稱為貼附(錨著)依賴性細(xì)胞。
目前已有很多種細(xì)胞能在體外培養(yǎng)生長(zhǎng),包括正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞。例如:成纖維細(xì)胞、骨骼組織(骨及軟骨)、心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺、皮膚等組織來(lái)源細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞、黑色素細(xì)胞及各種腫瘤細(xì)胞等。這些細(xì)胞在活體體內(nèi)時(shí),各自具有其特殊的形態(tài);但在體外培養(yǎng)狀態(tài)下,其貼附生長(zhǎng)型細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)得比較單一化,失去其在體內(nèi)原有的某些特征。一般可將貼附生長(zhǎng)的體外培養(yǎng)細(xì)胞從形態(tài)上大體分為上皮細(xì)胞型和成纖維細(xì)胞型兩類,還有一些難以確定其穩(wěn)定形態(tài)的細(xì)胞。
1)、上皮細(xì)胞型(圖1-1A):細(xì)胞培養(yǎng)中的上皮細(xì)胞指那些形態(tài)上類似上皮細(xì)胞,其來(lái)源于外胚層及內(nèi)胚層的細(xì)胞,如皮膚及其衍生物、乳腺、肝、肺泡、消化道上皮等組織的細(xì)胞,上皮性腫瘤(如鱗狀細(xì)胞癌)等的培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)均呈上皮樣。培養(yǎng)中的上皮細(xì)胞形態(tài)為扁平的多角形,胞質(zhì)近中央處有圓形的細(xì)胞核。其生長(zhǎng)特點(diǎn)為細(xì)胞之間緊密相靠、互相接,呈“鋪路石”狀,具有連接成片的能力。
2)、成纖維細(xì)胞型(圖1-1B、C):起源于中胚層組織的細(xì)胞,如:纖維結(jié)締組織、平滑肌、心肌、血管內(nèi)皮等。本型細(xì)胞的形態(tài)似在體內(nèi)生長(zhǎng)的成纖維細(xì)胞,具有長(zhǎng)短不等的數(shù)個(gè)細(xì)胞突起,因而多呈梭形、不規(guī)則三角形或扇形,核為卵圓形位于靠近胞質(zhì)的中央。其生長(zhǎng)特點(diǎn)為細(xì)胞一般并不緊靠相連成片,而是排列為漩渦狀、放射狀,或柵欄狀。
上述兩種以形態(tài)分類的名稱,僅是一種籠統(tǒng)的提法,并不是很確切。體外培養(yǎng)時(shí)所謂的上皮細(xì)胞型細(xì)胞或成纖維細(xì)胞型細(xì)胞,僅是因?yàn)槠湫螒B(tài)與體內(nèi)的上皮細(xì)胞或成纖維細(xì)胞類似,并不能將體外培養(yǎng)的這些細(xì)胞與體內(nèi)同名的細(xì)胞完全等同;而且,這種名詞系用于描述細(xì)胞的外形而并非說(shuō)明細(xì)胞的起源。與這兩種形態(tài)類似的細(xì)胞,可能來(lái)自不同性質(zhì)的細(xì)胞亞類。取自不同組織的上皮細(xì)胞,其生化特征及其原來(lái)的形態(tài)可有差異;而來(lái)自不同組織的形態(tài)相似的成纖維細(xì)胞,其發(fā)展的趨向可能并不相同。例如:在體外培養(yǎng)中,可從脾臟及骨髓各自分離出形態(tài)相似的“成纖維細(xì)胞”,但是當(dāng)接種這些細(xì)胞于同源的動(dòng)物時(shí),只有那些來(lái)自骨髓的“成纖維細(xì)胞”才有可能形成骨樣組織。因此,采用上皮樣細(xì)胞或成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞的名詞似乎更為恰當(dāng)。此外,體外培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)并不完全是恒定的,可因各種因素而發(fā)生改變,包括pH、細(xì)胞密度、污染等的影響。例如:Hela細(xì)胞本身是上皮細(xì)胞型,但若培養(yǎng)的條件過(guò)酸或過(guò)堿,則可呈現(xiàn)為梭形而似成纖維細(xì)胞樣;有些細(xì)胞在高濃度血清中生長(zhǎng)時(shí)為細(xì)長(zhǎng)的成纖維細(xì)胞樣,在低濃度血清中則更似上皮樣。
1.2 懸浮生長(zhǎng)型細(xì)胞
少數(shù)細(xì)胞類型在體外培養(yǎng)時(shí)不需要附著于底物,在懸浮狀態(tài)下即可生長(zhǎng),包括一些取自血、脾或骨髓的培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是血液白細(xì)胞,以及癌細(xì)胞。這些細(xì)胞在懸浮中生長(zhǎng)良好,可以是單個(gè)細(xì)胞或?yàn)槲⑿〉募?xì)胞團(tuán),觀察時(shí)細(xì)胞呈圓形。由于懸浮生長(zhǎng)于培養(yǎng)液之中,因此其生存空間大,具有能夠提供繁殖大量細(xì)胞、傳代繁殖方便(只需稀釋而不需消化處理)、易于收獲細(xì)胞等優(yōu)點(diǎn),并且適于進(jìn)行血液病的研究。缺點(diǎn)是不如貼附生長(zhǎng)型觀察方便,而且并非所有的培養(yǎng)細(xì)胞都能懸浮生長(zhǎng)。
來(lái)源:《細(xì)胞培養(yǎng) 第3版 - 劉斌;司徒鎮(zhèn)強(qiáng)》電子書 第一章第5節(jié)
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