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ISO 6579.1:2017沙門氏菌檢驗(yàn)重點(diǎn)分享

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來(lái)源:“六扇門study”公眾號(hào)

沙門氏菌

ISO 6579.1-2017《食物鏈微生物學(xué) - 沙門氏菌檢驗(yàn)、計(jì)數(shù)和血清分型的基準(zhǔn)法 - 第 1 部分: 沙門氏菌檢驗(yàn)》,在2020年進(jìn)行了修訂,小六與大家分享2020版的學(xué)習(xí)心得。

分享重點(diǎn)1:RVS 代替 SC

將傷寒和副傷寒沙門氏菌的定性檢驗(yàn)方法,從標(biāo)準(zhǔn)正文中單列出來(lái),在附錄D中予以介紹。并且只有在檢驗(yàn)傷寒和副傷寒沙門氏菌時(shí),才將亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液作為選擇性增菌增菌液。與其他選擇性增菌液不同,SC選擇性弱,毒性大,但對(duì)傷寒和副傷寒沙門氏菌的抑制作用弱。

分享重點(diǎn)2: 覆蓋范圍廣泛

覆蓋范圍廣泛,檢驗(yàn)范圍涵蓋了食品、飼料、動(dòng)物排泄物、以及食品生產(chǎn)加工環(huán)境的樣品,成為了名副其實(shí)、覆蓋全食物鏈的沙門氏菌檢驗(yàn)基準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)。

但食品、飼料、食品生產(chǎn)加工環(huán)境的樣品的檢驗(yàn)流程(A)與初加工階段的動(dòng)物排泄物和環(huán)境樣品(B)略有差異,B類樣品在選擇性增菌環(huán)節(jié),只接種到“改良MSRV培養(yǎng)基,41.5℃±1°C培養(yǎng)24h±3h,或繼續(xù)培養(yǎng)24h±3h”。(見(jiàn)下圖)


初加工階段的動(dòng)物排泄物和環(huán)境樣品菌群比較復(fù)雜,需要提高其選擇篩選的效果。

MSRV中氯化鎂和孔雀石綠對(duì)大腸桿菌、變形桿菌、克雷伯菌、假單胞菌有較強(qiáng)的抑制作用,但不抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)。

RVS中含有大豆胨,比較有利于沙門氏菌的復(fù)蘇,一般加工后的食品菌受損嚴(yán)重,需要較好的復(fù)蘇能力,一般采用RVS較多。

分享重點(diǎn)3: 擴(kuò)大培養(yǎng)溫度范圍

ISO 6579.1-2017將預(yù)增菌和純培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度,“37℃±1°C”擴(kuò)大至“34℃~38℃”。

2020修訂版,又進(jìn)一步擴(kuò)大了選擇性增菌和分離的培養(yǎng)溫度,將 MKTTn、SC和XLD、BS的培養(yǎng)條件從“37℃±1°C培養(yǎng)24h±3h”擴(kuò)大至“34℃~38℃培養(yǎng)24h±3h”。

目前僅RVS和改良MSRV培養(yǎng)溫度為“41.5℃±1°C培養(yǎng)24h±3h”。

估計(jì)主要是考慮到跟不同國(guó)家的標(biāo)準(zhǔn)的兼容性,如美國(guó)、日本35°C±1°C,中國(guó)36°C±1°C等。“34℃~38℃”的溫度范圍,表示35°C±1°C、 36°C±1°C、36°C±2°C、37°C±1°C的培養(yǎng)溫度都符合標(biāo)準(zhǔn)的要求。


分享重點(diǎn)4: 給出滅菌后的培養(yǎng)基與試劑的保存期限

在附錄B中規(guī)定了滅菌后的培養(yǎng)基與試劑的保存期限,對(duì)檢驗(yàn)人員來(lái)說(shuō)確實(shí)具有實(shí)際指導(dǎo)意義的條款,以下供參考。


分享重點(diǎn)5: 標(biāo)準(zhǔn)中涵蓋了培養(yǎng)基驗(yàn)收要求

標(biāo)準(zhǔn)附錄B中很清晰寫明如何對(duì)檢驗(yàn)所需的培養(yǎng)基進(jìn)行驗(yàn)收,具有很好的操作方便性。


ISO6579沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),作為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織經(jīng)過(guò)優(yōu)化改良的方法更加具有廣泛的學(xué)習(xí)與借鑒意義。沙門氏菌作為影響全球肉奶漁生產(chǎn)與大宗貿(mào)易的重要生物因子,在過(guò)去40年間,檢驗(yàn)程序與方法歷經(jīng)各國(guó)、各專業(yè)機(jī)構(gòu)的千錘百煉,具有很好的指導(dǎo)意義。

本次GB4789.4的修訂也在逐漸與ISO標(biāo)準(zhǔn)接軌,如將RVS 作為沙門氏菌的選擇性增菌液,乳粉樣品前處理采用的是室溫浸泡法等,相信新標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布將更好的服務(wù)于行業(yè)發(fā)展應(yīng)用需求,通過(guò)更加科學(xué)的培養(yǎng)基選擇,適宜的樣品前處理等手段,更加精準(zhǔn)的發(fā)現(xiàn)食品中的沙門氏菌,為控制由沙門氏菌引起的食源性疾病爆發(fā)將作出很大的貢獻(xiàn)。

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