071748 沙門氏菌生化鑒定盒(10種×10次)(SN標(biāo)準)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應(yīng)的10種試劑(表1)、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。
二)生化管的使用方法
開啟西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在無菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
注意：氰化鉀生化管，應(yīng)盡量將膠塞套緊，以免氰化鉀揮發(fā)造成假陽性!。(如果發(fā)現(xiàn)氰化鉀生化鑒定管的顏色由淺黃色變?yōu)樯詈稚?/p>
或黑色即為變質(zhì)，不能繼續(xù)使用)
三)沙門氏菌生化鑒定盒的詳細使用方法
沙門氏菌為需氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌，有動力，有周鞭毛(但有無動力的變種)，最適溫度為37℃，最適pH為7.2～7.6，
在固體培養(yǎng)基上37℃ 24h～48h菌落可呈中等大小，光滑，圓形，濕潤，隆起，在液體培養(yǎng)基內(nèi)生長均勻渾濁。
挑取平板分離的可疑菌落直接進行三糖鐵瓊脂和營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)，將可疑菌落置于已配備的無菌生理鹽水中，與0.5 McFarland的濁度管比濁，將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL )，用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞，一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示)，特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示)，直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2)，或放置于合適的瓶架中，于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，結(jié)果觀察見表1。
注意：如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間或培養(yǎng)方式，請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
四)沙門氏菌生化鑒定特征
自選擇性瓊脂平板上直接挑取至少2個典型或可疑菌落，分別用接種針接種賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基或尿素酶瓊脂一管，接種后無須
滅菌接種針，直接再接種三糖鐵瓊脂一管于37℃培養(yǎng)24±2h。按表2或表3結(jié)果進行判斷。
將符合表2 或表3 可疑沙門氏菌屬特性的三糖鐵瓊脂培養(yǎng)物，接種于普通肉湯中37℃培養(yǎng)18-24h 或用0.85%無菌生理鹽水
稀釋至5McFarland (約109cfu/mL), 各吸取0.05-0.08mL(約1～2 滴)的肉湯培養(yǎng)物或菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。按表4
進行生化試驗(表中賴氨酸脫羧酶試驗或尿素試驗的結(jié)果見表2 或表3 的結(jié)果，不再另做。)
