細(xì)胞培養(yǎng)中的酚紅指示劑
發(fā)布時(shí)間：2023-07-27 瀏覽次數(shù)：4862
細(xì)胞培養(yǎng)基中為什么添加酚紅，什么情況下需要用不含酚紅的培養(yǎng)基?
酚紅是一種常用的指示劑，通常在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加酚紅是為了判斷培養(yǎng)基的酸堿性質(zhì)，以及觀察細(xì)胞生長(zhǎng)的情況。
含有酚紅的溶液在pH值為6.8及以下時(shí)呈現(xiàn)黃色。隨著pH值的上升，顏色會(huì)逐漸變紅，直至達(dá)到7.6 時(shí)，溶液呈現(xiàn)出粉紅色，在pH值為8.2以上時(shí)又變成明亮的紫紅色。通過(guò)觀察酚紅的顏色變化，可以判斷培養(yǎng)基的pH值，這對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)和生存非常重要。（詳見(jiàn)培養(yǎng)液酸堿度（pH）對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響）
（Phenol red, 40 μM: colors in cell culture medium at a pH range from 6.0 to 8.0 Created by Max Schwalbe）
然而，并非所有情況下都需要使用含有酚紅的培養(yǎng)基。有時(shí)候，研究人員可能需要進(jìn)行特定實(shí)驗(yàn)，其中酚紅的存在可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾。在這種情況下，可以選擇使用不含酚紅的培養(yǎng)基，以避免任何可能的干擾。
簡(jiǎn)言之，添加酚紅是便于觀察培養(yǎng)基的酸堿性質(zhì)和細(xì)胞生長(zhǎng)情況，但在某些特定實(shí)驗(yàn)中可能需要使用不含酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾的情況包括以下幾個(gè)方面：
1st 光譜干擾：酚紅本身在某些波長(zhǎng)下具有吸光特性，可能會(huì)干擾光譜分析實(shí)驗(yàn)或需要特定波長(zhǎng)下測(cè)量的實(shí)驗(yàn)。
2nd 細(xì)胞代謝影響：某些細(xì)胞類型對(duì)酚紅較為敏感，酚紅可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的代謝活性、增殖速率或細(xì)胞形態(tài)產(chǎn)生影響，從而干擾細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3rd 色素沉淀：酚紅在一些特定條件下可能會(huì)發(fā)生沉淀或析出，特別是在長(zhǎng)期培養(yǎng)或高溫條件下，這可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)的變化或培養(yǎng)基中出現(xiàn)顆粒物，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4th 穩(wěn)定性問(wèn)題：酚紅可能會(huì)受到氧化或分解等因素的影響，導(dǎo)致顏色變化或降解產(chǎn)物的形成。這可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性造成影響。
此外，有一些研究表明，酚紅可能具有雌激素樣活性，即在體外或體內(nèi)模型中，它可以與雌激素受體結(jié)合并引發(fā)一些雌激素反應(yīng)。
這些研究主要基于以下發(fā)現(xiàn)：
1 細(xì)胞增殖：一些研究發(fā)現(xiàn)，在某些細(xì)胞系中（如激素敏感性乳腺癌細(xì)胞），酚紅可以促進(jìn)細(xì)胞增殖，這與雌激素促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用類似。
2 基因表達(dá):一些研究顯示，酚紅可以通過(guò)調(diào)節(jié)基因表達(dá)來(lái)模擬雌激素的作用，例如促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞中雌激素受體相關(guān)基因的表達(dá)。
3 酶活性：研究發(fā)現(xiàn)，酚紅可以影響某些酶的活性，這些酶與雌激素代謝和信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)。
然而，也有些研究并未觀察到酚紅具有明顯的雌激素效應(yīng)。結(jié)果可能受到細(xì)胞類型、實(shí)驗(yàn)條件、濃度和培養(yǎng)基等多種因素的影響。此外，酚紅的雌激素樣活性在體內(nèi)是否具有生物學(xué)意義仍存在爭(zhēng)議，尚未得到充分證實(shí)。
因此，在研究中，對(duì)于雌激素效應(yīng)的評(píng)估，最好的做法是使用適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和對(duì)照組，同時(shí)對(duì)酚紅的存在進(jìn)行適當(dāng)?shù)目刂坪徒忉?。如果研究涉及到雌激素效?yīng)的定量和機(jī)制研究，最好選擇使用經(jīng)過(guò)嚴(yán)格驗(yàn)證的正性對(duì)照物質(zhì)來(lái)確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
在上述情況下，研究人員可能會(huì)選擇使用不含酚紅的培養(yǎng)基，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。此外，如果實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不需要酚紅的酸堿指示功能，使用不含酚紅的培養(yǎng)基也可以簡(jiǎn)化。
大多數(shù)常見(jiàn)的細(xì)胞株在含有酚紅的培養(yǎng)基中是耐受的，并不敏感。然而，有一些細(xì)胞株對(duì)酚紅可能表現(xiàn)出敏感性或不良反應(yīng)。以下是一些可能對(duì)酚紅敏感的細(xì)胞類型的示例：
● 嗜酸性細(xì)胞：某些嗜酸性細(xì)胞（acidophilic cells）可能對(duì)酚紅敏感。酚紅在酸性環(huán)境下呈黃色，可能干擾這些細(xì)胞的正常生理過(guò)程。
● 神經(jīng)細(xì)胞：某些神經(jīng)細(xì)胞對(duì)酚紅可能會(huì)表現(xiàn)出過(guò)敏反應(yīng)或細(xì)胞毒性。這些細(xì)胞對(duì)外部刺激非常敏感，包括培養(yǎng)基中的添加劑。
● 特定腫瘤細(xì)胞：某些特定的腫瘤細(xì)胞可能對(duì)酚紅或其他指示劑敏感。這些細(xì)胞可能在含有酚紅的培養(yǎng)基中顯示異常的生長(zhǎng)或代謝行為。
請(qǐng)注意：對(duì)酚紅的敏感性是相對(duì)而言的，取決于細(xì)胞類型、細(xì)胞狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)條件等因素。如果你正在使用特定的細(xì)胞株或進(jìn)行特殊的實(shí)驗(yàn)研究，最好先進(jìn)行文獻(xiàn)調(diào)查或咨詢專業(yè)人士，以了解關(guān)于該細(xì)胞類型是否對(duì)酚紅敏感的特殊情況。這樣可以確保實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的準(zhǔn)確性和可靠性。
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