無菌檢查用硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基配制常見問題及解決方法
發(fā)布時間：2023-09-22 瀏覽次數(shù)：2587
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（簡稱FT）可用于需氧菌、兼性需氧、厭氧菌的培養(yǎng)，是藥品生物制品及器械無菌檢查的常用培養(yǎng)基之一。
FT的特點：該培養(yǎng)基配方特性比較特殊，含少量瓊脂，配制成溶液后呈流體狀，降低液體內對流，防止二氧化碳、氧氣和還原產物的擴散，且含有還原性的胱氨酸、硫乙醇酸鈉和氧氣指示劑刃天青，有利于溶液內部形成厭氧環(huán)境，且通過氧氣指示劑顏色變化區(qū)分厭氧層和氧化層。在進行厭氧菌培養(yǎng)時，不需借助厭氧罐、厭氧培養(yǎng)箱等設備，也不需覆蓋無菌液體石蠟。
FT配制使用中的常見問題及解決方法：
1、滅菌后澄清透明，但放置或培養(yǎng)一段時間后培養(yǎng)基內常出現(xiàn)一些絮狀物，難以與生長的微生物相區(qū)別？
原因分析：因FT配方含少量瓊脂，如在配制時沒有充分加熱將少量瓊脂煮溶，且加熱和分裝時沒有充分攪拌將溶解的瓊脂均勻分布于溶液中，那么分裝滅菌冷卻后溶液中瓊脂量相對稍多的培養(yǎng)基內部瓊脂會凝固成團，因此就會出現(xiàn)白色絮狀懸浮物。此外，也有可能與使用的瓊脂粉本身的澄清度、溶解度和凝固特性有關，如瓊脂本身粘度高，難分散均勻，或者瓊脂容易聚集凝固，也容易出現(xiàn)絮狀懸浮物。
解決方法：
1）將瓊脂充分煮溶并攪拌使其均勻分布【1】。配制時將培養(yǎng)基粉末或顆粒溶于純化水中邊加熱邊攪拌均勻，需加熱至完全溶解，建議攪拌煮至沸騰并維持2~3分鐘，再邊攪拌邊分裝，分裝后采用經(jīng)驗證的滅菌程序滅菌。
2）選擇使用高透型瓊脂作為原料的FT培養(yǎng)基【2】。如，我司貨號028034/028034P1的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(高透明度) 產品及其對應即用型成品。
2、培養(yǎng)基滅菌后只存放一天就變青藍色或淺粉紅色？
原因分析：該培養(yǎng)基含刃天青氧氣指示劑，氧氣充足顯紅色，完全厭氧顯無色，從有氧過渡到無氧或者從無氧過渡到有氧時呈青藍。因此，滅菌后存放一天就整瓶或整管變色，一方面跟培養(yǎng)基本身的氧化還原能力有關，另一方面跟分裝容器內氧氣量有關。如培養(yǎng)基開封后沒有密封好，存放期間空氣中的氧氣持續(xù)氧化培養(yǎng)基中的還原性成分，導致該培養(yǎng)基還原性能下降，因此配制滅菌后培養(yǎng)基短時間內容易全被氧化使氧氣指示劑變色。也可能是分裝容器體積比分裝培養(yǎng)基量大很多，容器內空氣層大，且非密閉容器，培養(yǎng)基量少還原能力差容易被氧氣氧化所致。
解決方法：
1）干粉或顆粒培養(yǎng)基開封后需立即旋緊瓶蓋，減緩培養(yǎng)基被空氣氧化速度，保證其質量。
2) 滅菌前分裝至適宜的容器中，其裝量與容器高度的比例應不小于2/3,如非壓蓋瓶分裝，滅菌后從滅菌鍋拿出來需趁熱旋緊瓶蓋或管蓋，以減少瓶內氧氣量。
3）選擇即用型成品培養(yǎng)基。這類產品在生產過程中采用先進技術驅氧，可以很好解決培養(yǎng)基氧化層的問題。如：高透明硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基即用型產品系列。
參考文獻
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