GB4789.28—2024參比培養(yǎng)基質(zhì)控解析及圖譜—SDA篇
發(fā)布時(shí)間：2024-05-22 瀏覽次數(shù)：1435
前面已經(jīng)與大家分享了TSA參比培養(yǎng)基的質(zhì)控解析及相應(yīng)的圖譜，同樣，SDA參比培養(yǎng)基在國(guó)標(biāo)GB4789.28中對(duì)酵母菌、霉菌培養(yǎng)用的培養(yǎng)基質(zhì)控有著同等重要地位，今天大家就跟隨小編的腳步一起來(lái)看一下作為參比培養(yǎng)基的SDA，其質(zhì)控解析及相應(yīng)圖譜吧！
沙氏葡萄糖瓊脂（Sabouraud Dextrose Agar Medium，SDA）參比培養(yǎng)基，其質(zhì)控分四步走。
第一，核對(duì)配方成分，應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)一致。即符合如下表配方：
| 蛋白胨 | 5.0g |
| 酪蛋白胨 | 5.0g |
| 葡萄糖 | 40.0g |
| 瓊脂 | 15.0g |
第二，使用者審核參比培養(yǎng)基檢測(cè)報(bào)告，是否由具備相應(yīng)檢驗(yàn)?zāi)芰?，并取得通過(guò)國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可資質(zhì)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的檢測(cè)報(bào)告。
第三，理化指標(biāo)應(yīng)滿(mǎn)足的條件如下：
① 肉眼觀察，并記錄干燥培養(yǎng)基粉末顏色：淡黃色粉末。
② 滅菌后溶液顏色、透明度：滅菌后為淡黃色透明膠體。
③ PH測(cè)試，121℃高壓滅菌15min后，傾倒平板，待凝固平衡至25℃時(shí)測(cè)定，應(yīng)為5.6±0.2℃。
④ 凝膠強(qiáng)度測(cè)試，SDA培養(yǎng)基制成平板或斜面，冷凝后用10μL接種環(huán)在其上劃線(xiàn)，普通平板可采用三區(qū)/四區(qū)劃線(xiàn)法，斜面采用之字形劃線(xiàn)法，觀察劃線(xiàn)過(guò)程中的破裂情況，要求劃線(xiàn)不破。
第四，最最關(guān)鍵的微生物學(xué)促生長(zhǎng)能力，應(yīng)滿(mǎn)足在規(guī)定的培養(yǎng)和時(shí)間內(nèi)，生長(zhǎng)良好且符合相應(yīng)的菌落形態(tài)特征。
微生物學(xué)促生長(zhǎng)能力試驗(yàn)方法參照下面方法：
Step1、將白色念珠菌、釀酒酵母接種到非選擇性液體培養(yǎng)基（如沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基等）培養(yǎng)或使用非選擇性培養(yǎng)基平板/斜面（普通SDA、PDA等）進(jìn)行培養(yǎng)。將培養(yǎng)后渾濁的菌液進(jìn)行10倍系列稀釋。平板或斜面菌苔則刮取一定量進(jìn)行稀釋?zhuān)ㄟ@種操作很大程度依賴(lài)于檢驗(yàn)員的經(jīng)驗(yàn)）。黑曲霉、桔青霉、產(chǎn)黃青霉接種于裝有上述瓊脂培養(yǎng)基的羅氏瓶或者較粗試管中，鋪成斜面，進(jìn)行涂布或劃線(xiàn)，培養(yǎng)過(guò)程中保持良好的透氣性，且不污染環(huán)境，進(jìn)行培養(yǎng)，直至長(zhǎng)出豐富的孢子。將孢子進(jìn)行洗脫，之后進(jìn)行10倍系列稀釋。選取適宜的稀釋級(jí)（要求酵母菌每0.1ml菌含量50—250cfu，霉菌每0.1ml菌液其菌含量在30—150cfu）。
Step2、選擇適宜稀釋度的工作菌懸液0.1mL，涂布或螺旋接種于測(cè)試平板上，每稀釋度做兩個(gè)平板。按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的條件培養(yǎng)，觀察并記錄。
為了讓大家更形象直觀的看到以上五種菌在SDA參比培養(yǎng)基上的具體形態(tài)，小編使用環(huán)凱自主研發(fā)生產(chǎn)的SDA參比培養(yǎng)基，測(cè)試菌株在SDA參比培養(yǎng)基上的高清無(wú)碼圖見(jiàn)下表（以下圖片均為環(huán)凱原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載或引用請(qǐng)注明出處）
附表：測(cè)試菌株在SDA參比培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)
| 菌株名稱(chēng)及編號(hào) | 培養(yǎng)條件 | 接種量/cfu | 菌落特征圖 | 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
|---|---|---|---|---|
| 黑曲霉CMCC(F)98003 | 28℃，72h | 40 |  | 生長(zhǎng)良好，白色菌絲，黑色孢子 |
| 白色念珠菌CMCC(F)98001 | 28℃，72h | 113 |  | 生長(zhǎng)良好，白色圓形菌落 |
| 釀酒酵母CMCC(F)98018 | 28℃，72h | 72 |  | 生長(zhǎng)良好，奶油色圓形菌落 |
| 桔青霉CMCC(F)98028 | 28℃，72h | 141 |  | 生長(zhǎng)良好，白色菌絲，綠色孢子 |
| 產(chǎn)黃青霉CMCC(F)98801 | 28℃，72h | 67 |  | 生長(zhǎng)良好，白色菌絲，綠色孢子 |
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