產(chǎn)品名稱:Taq DNA 聚合酶(with dNTP)
英文名稱:Taq DNA Polymerase(with dNTP)
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:
編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 |
HKE001-01A | Taq DNA Polymerase(with dNTP) | 500U | Tap DNA 聚合酶 |
產(chǎn)品描述:本制品是 94kDa 的耐熱性 DNA 聚合酶, 是把 Thermus aquaticus DNA Polymerase 基因在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)后經(jīng)多次純化分離而得到的。它與天然 Taq DNA 聚合酶具有相同的功能。使用本制品擴(kuò)增得到的 PCR 產(chǎn)物的 3′端附有一個"A"堿基,因此可直接克隆于 T 載體中。配以環(huán)凱生物獨特配方的 5×反應(yīng)緩沖液(已添加 Mg2+)可獲得更加理想的擴(kuò)增結(jié)果。
產(chǎn)品特點:
高效:以λDNA 為模板,擴(kuò)增長度可達(dá) 8kb,可以高效擴(kuò)增≤4kb 片段。
靈敏:可從 0.05ng 人基因組 DNA 模板中擴(kuò)增出特定基因片段。
高品質(zhì):完全滿足Real Time PCR 的實驗要求。
獨特配方的 5×Buffer:使PCR 擴(kuò)增反應(yīng)更加穩(wěn)定、靈敏、高效。
產(chǎn)品用途:
1)常規(guī)PCR 鑒定;
2)小片段目標(biāo)基因克?。?br /> 3)平端PCR 產(chǎn)物加 A;
4)雙脫氧法測序;
5)熒光定量PCR。
使用建議:
1、使用本試劑擴(kuò)增得到的PCR 產(chǎn)物 3′端有一突出"A"堿基,可直接 克隆于 T 載體中。
2、擴(kuò)增較長片段建議換用Fast Pfu DNA 聚合酶(Cat No:HKE031)。
應(yīng)用實例:圖例一)50μl 擴(kuò)增體系中,以 5ng λDNA 為模板,對 500bp~6.0kb 的擴(kuò)增結(jié)果。
泳道 M:1kb DNA Ladder Plus II;
泳道 1:0.5kb;
泳道 2:1.0kb;
泳道 3:2.0kb;
泳道 4:3.0kb;
泳道 5:4.0kb;
泳道 6:6.0kb。
注意事項:
1)2mM Mg2+可滿足絕大多數(shù)PCR 擴(kuò)增,對于某些 PCR,為了保證較好的擴(kuò)增,可調(diào)節(jié)為 2-4mM。
2)體系中加入推薦的酶量,可以滿足大多數(shù) PCR 擴(kuò)增,對于某些PCR,為了得到較好的擴(kuò)增,可適當(dāng)增加酶量。
保存溫度:-20℃。
產(chǎn)品包裝(A 包裝):
質(zhì)量保證:經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE 膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶;qPCR 方法檢測無大腸桿菌DNA 殘留,無核酸內(nèi)、外切酶污染。
活性定義:在74℃條件下,30 分鐘內(nèi)催化10nmol dNTPs的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個單位。
常用反應(yīng)體系(50μl):
常用PCR循環(huán):