產(chǎn)品名稱:2×Taq Master Mix(Quick Load)
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:
編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 產(chǎn)品價格 |
HKE005-02A | 2×Taq Master Mix(Quick Load) | 1ml×5 | Mix預(yù)混液 |
產(chǎn)品描述:本制品是將PCR反應(yīng)所需的Taq酶、dNTPs、MgCl2以及反應(yīng)緩沖液預(yù)先配制成2倍濃度的混合物。2×Taq Master Mix專為常規(guī)PCR擴(kuò)增反應(yīng)優(yōu)化,擴(kuò)增長度可達(dá)8kb,能對4kb及其以下長度的片段進(jìn)行高效地擴(kuò)增。使用時只需再加入模板和引物并稀釋到1 倍濃度即可進(jìn)行PCR反應(yīng),大大地簡化了操作過程,減少了PCR操作過程中的污染。2 × Taq Master Mix提供普通型/快速上樣型兩種形式供您選擇。經(jīng)測試,染料的加入不影響PCR反應(yīng),在PCR 反應(yīng)完成后可直接電泳,節(jié)省時間。
產(chǎn)品特點:
高效:以λDNA為模板,擴(kuò)增長度可達(dá)8kb,能高效擴(kuò)增≤4kb 片段。
靈敏:可從0.05ng人基因組DNA模板中擴(kuò)增出特定基因片段。
穩(wěn)定:反復(fù)凍融幾十次,4℃放置30天,室溫放置一周后,擴(kuò)增性能不受影響。
快捷:PCR反應(yīng)所必需試劑全集于一管之中,數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配制。
便利:PCR反應(yīng)后可直接電泳(含染料形式)。
產(chǎn)品用途:
1)常規(guī)PCR 鑒定;
2)小片段目標(biāo)基因克??;
3)平端PCR 產(chǎn)物加 A。
使用建議:
1、使用本試劑擴(kuò)增得到的PCR 產(chǎn)物 3′端有一突出"A"堿基,可直接 克隆于 T 載體中。
2、當(dāng)擴(kuò)增較長片段時,推薦使用2×Taq plus Master Mix(Cat.No: HKE007)。
應(yīng)用實例:圖例)使用普通(A組)及含染料(B組)的2×Taq Master Mix配制的50μl擴(kuò)增體系,以5ng λDNA為模板, 對500bp~6.0kb片段的擴(kuò)增結(jié)果。
泳道1:500bp;
泳道2:1kb;
泳道3:2kb;
泳道4:4kb;
泳道5:6kb;
泳道M:1kb DNA Ladder Plus II。
保存溫度:-20℃。
產(chǎn)品包裝(A 包裝):
質(zhì)量保證:經(jīng)檢測無外源核酸酶殘留,qPCR 方法檢測無大腸桿菌DNA 殘留,能有效擴(kuò)增人基因組中的單拷貝基因。
常用反應(yīng)體系(50μl):
常用PCR循環(huán):
注意事項:
1)需要溶解完全后使用,防止離子濃度不均勻。
2)菌液PCR 時預(yù)變性時間≥5min,更有利于破壁。
3)應(yīng)根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇合適的循環(huán)數(shù),循環(huán)數(shù)過少, 會造成擴(kuò)增量不足;循環(huán)數(shù)過多,擴(kuò)增量增加, 但突變率也會增加,并造成非特異性擴(kuò)增。
4)根據(jù)引物Tm 值設(shè)置合適退火溫度,退火溫度過低,會造成非特性擴(kuò)增;過高可能擴(kuò)增不到。