產(chǎn)品名稱:水生動物病原 DNA/RNA 提取試劑盒(硅膠膜吸附柱法)
英文名稱:Aquatic Animal Pathogen DNA/RNA Extraction Kit
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:
編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
TQ001AH2 | 水生動物病原 DNA/RNA 提取試劑盒(硅膠膜吸附柱法) | 50 份/盒 |
產(chǎn)品簡介:本試劑盒利用特制的裂解液和特異性吸附核酸的硅膠膜離心吸附柱,可以快速簡單地從各種水生動物組織樣本中得到高質(zhì)量的病原體(病毒、致病菌)DNA 或 RNA。提取獲得的 DNA/RNA 純度高、質(zhì)量穩(wěn)定,適用于各種常規(guī)分子實驗操作,包括反轉(zhuǎn)錄、PCR、RT-PCR、LAMP 檢測等。
試劑盒組成:
序號 | 產(chǎn)品組成 | 規(guī)格 |
1 | 裂解液 | 30 mL |
2 | 蛋白酶 K | 1 mL |
3 | 去蛋白緩沖液 | 24 mL(使用前加 16 mL 無水乙醇) |
4 | 漂洗液 | 15 mL(使用前加 60 mL 無水乙醇) |
5 | 洗脫液 | 10 mL |
6 | 硅膠膜吸附柱(RNase-Free) | 50 套 |
儲存條件及有效期:室溫保存,有效期一年,2~8 ℃條件下儲存更佳,儲存過程中若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前將其在室溫放置一段時間或 37 ℃條件下溫育,待充分溶解后搖勻即可使用。蛋白酶 K 于 2~8 ℃儲存(-20 ℃長期保存)。
用戶自備材料與工具:
水生動物病原 DNA/RNA 提取試劑盒(硅膠膜吸附柱法)使用方法:
● 初次使用前請確保去蛋白緩沖液和漂洗液中已按說明加入指定量的無水乙醇。
1、取適量的待檢水生動物組織樣品加入 1~5 倍體積的生理鹽水進(jìn)行勻漿。
2、取 200 μL 勻漿液至 1.5 mL 離心管中,加入 500 μL 裂解液、20 μL 蛋白酶 K,渦旋振蕩混勻,65℃孵育 15 min。
3、12000 rpm 離心 2 min,小心吸取 400 μL 上清液至一個新的 1.5 mL 離心管中,加入 250 μL 無水乙醇,渦旋振蕩混勻,室溫靜置 3 min。
4、將上一步的全部液體加入到硅膠膜吸附柱上(吸附柱套入收集管中),12000 rpm 離心 1 min,倒掉濾液,吸附柱套回收集管。
5、加入 500 μL 去蛋白緩沖液,12,000 rpm 離心 1 min,倒掉濾液,吸附柱套回收集管。
?(去蛋白緩沖液初次使用前加入 16 mL 無水乙醇。)
6、加入 500 μL 漂洗液,12,000 rpm 離心 1 min,倒掉濾液,吸附柱套回收集管。
? (漂洗液初次使用前加入 60 mL 無水乙醇。)
7、重復(fù)步驟 6。
8、再次 12,000 rpm 離心 2 min,徹底去除吸附柱中殘留的液體。將吸附柱套入新的 1.5 mL 離心管中,打開蓋子,室溫放置 2 min,去除殘留的乙醇。
9、向吸附柱中央處懸空滴加 50~100 μL 洗脫液,室溫靜置 5 min,12,000 rpm 離心 2 min,離心所得液體即為待檢病原核酸溶液。短期保存可置于-20 ℃,長期保存應(yīng)置于-80 ℃。
注意事項:
1、實驗前請仔細(xì)閱讀本試劑盒說明書,嚴(yán)格按操作步驟執(zhí)行。
2、本試劑盒提取所使用的一次性離心管和吸頭應(yīng)經(jīng)過高壓滅菌,且不含 DNase 和 RNase。
3、裂解液中含有胍鹽類蛋白變性劑,應(yīng)避免直接接觸皮膚,如有接觸請用大量清水沖洗。
4、實驗后妥善處理所有樣本和試劑材料,徹底清潔和消毒操作臺面。