在生物制藥生產(chǎn)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中如何在線(xiàn)監(jiān)測(cè)蛋白？
發(fā)布時(shí)間：2024-08-26 瀏覽次數(shù)：328
近年來(lái)，生物制藥市場(chǎng)迅速增長(zhǎng)，創(chuàng)造了一個(gè)高度競(jìng)爭(zhēng)的舞臺(tái)。在過(guò)程優(yōu)化方面，目前缺乏簡(jiǎn)單、快速和經(jīng)濟(jì)有效的、允許在工藝開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)特定蛋白質(zhì)進(jìn)行常規(guī)在線(xiàn)監(jiān)測(cè)的設(shè)備。
關(guān)鍵發(fā)現(xiàn)
本文報(bào)道了一種多功能的微流控蛋白分析盒，允許多路珠子免疫檢測(cè)直接從復(fù)雜的混合物中檢測(cè)特定蛋白。對(duì)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢（CHO）宿主細(xì)胞蛋白作為關(guān)鍵雜質(zhì)，單克隆抗體作為目標(biāo)生物藥物，乳酸脫氫酶作為細(xì)胞活力的標(biāo)記物進(jìn)行比色定量，檢測(cè)范圍為1?10 ng/mL，分析時(shí)間短至30 min。該裝置進(jìn)一步被證明用于在8天內(nèi)監(jiān)測(cè)利妥昔單抗產(chǎn)生的CHO細(xì)胞生物反應(yīng)器，提供了與標(biāo)準(zhǔn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒相當(dāng)?shù)幕厥章?。高靈敏度結(jié)合對(duì)矩陣干擾的魯棒性，突出了該設(shè)備執(zhí)行從生物反應(yīng)器到下游處理的在線(xiàn)測(cè)量的潛力。
結(jié)論
總的來(lái)說(shuō)，考慮到制備珠狀包裝設(shè)備的試劑要求較低和最少的處理時(shí)間，該設(shè)備顯示出作為多功能、可擴(kuò)展、一次性蛋白質(zhì)定量盒的顯著潛力，只需要目標(biāo)樣品的自動(dòng)化順序流動(dòng)，添加相應(yīng)的檢測(cè)器抗體和酶底物。此外，這些檢測(cè)方法可以擴(kuò)展到任何基于親和力的蛋白質(zhì)檢測(cè)，通過(guò)與各自的靶點(diǎn)結(jié)合性能來(lái)表征單抗功能，以及在任何細(xì)胞培養(yǎng)中其他治療性糖蛋白或生長(zhǎng)因子的應(yīng)用。此外，基于印跡TMB底物的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可以很容易地與任何成像設(shè)備集成，而不需要單色器或?yàn)V光裝置，甚至相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)樣品或內(nèi)部控制進(jìn)行視覺(jué)解釋。在與工業(yè)合作伙伴的合作中，正在開(kāi)展將設(shè)備材料轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓴U(kuò)展的熱塑性塑料，使用自動(dòng)化機(jī)器人工作站集成液體處理，并通過(guò)一個(gè)獨(dú)立平臺(tái)上的微型光學(xué)傳感器實(shí)現(xiàn)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，以提高處理性、可擴(kuò)展性和分析魯棒性。
圖1 用于珠狀免疫分析的微流控盒示意圖。該多路復(fù)用裝置包括四個(gè)互聯(lián)柱，充滿(mǎn)不同的偶聯(lián)珠，每個(gè)珠針對(duì)一個(gè)特定的蛋白質(zhì)：(i) CHO六方最密堆積，（ii）IgG，（iii）LDH，并包括（iv）一個(gè)內(nèi)部陽(yáng)性對(duì)照
來(lái)源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~陳諾
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